人主动脉平滑肌细胞

　一.细胞简介:

　　产品名称:HASMC细胞人主动脉平滑肌细胞

　　智立编码:20222179133725068

　　细胞数量:110^6

　　组织来源:主动脉

　　细胞种属:人源

　　生长特性:贴壁

　　培养基:rhFGF-basic0.5mL5ng/mLrhInsulin0.5mL5μg/mLAscorbicacid0.5mL50μg/mLL-glutamine25.0mL10mMrhEGF0.5mL5ng/mLFetalBovineSerum25.0mL5%

　　形态特征:形态变长,有时呈三角形

　　培养条件:胎牛血清至终浓度为10%。环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;温度,37℃

　　细胞描述:一种在低血清条件下繁殖血管平滑肌细胞的完整解决方案。

　　细胞冻存:液氮冻存(冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO)

　　细胞运输:干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25瓶)

　　二.注意事项

　　冻存细胞接收后的处理:

　　1.干冰运输,收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏;

　　2.收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

　　复苏细胞接收后的处理:

　　1.收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

　　2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片,若有贴壁细胞脱落,可收集上清离心,将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

　　3.建议收到当天不要消化处理,如果细胞长满90%,可选择传代处理。

　　4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

　　三.细胞培养方法:

　　1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

　　①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

　　②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

　　③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

　　④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

　　⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

　　⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

　　2、细胞复苏:

　　①将冻存管在37℃温水中摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

　　②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

　　3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

　　①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

　　②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

　　③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

　　④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。